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封面故事

2008 第四季

Clontech Lentiviral Expression System

Lentivirus structure

大小約80~120 nm,並帶有宿主細胞的脂質雙層外膜。病毒的genome 也是兩條單股線性RNA (雙倍體; Diploid)。此RNA genome 兩端外側均有long terminal repeat (LTR) 的序列,位於5 端的LTR 有promoter 的活性、而3 端的LTR 則作為terminator 。而主要的差異來自病毒基因,主要蛋白除了Gag,Pro ,Eve 之外還有其他病毒蛋白如Tat (Transactivator of Transcription),Rev (Regulator of Virion),Vpr (Viral Protein R)等。這些差異讓Lentivirus 的感染能力不再受限於細胞週期的影響,不管是分裂中或是不分裂的細胞都能感染。目前應用最多的是HIV (Human immunodeficiency virus),由於HIV 對於宿主細胞具有更強的感染能力,因此在人體基因治療上更具魅力,但也因為想摒除安全性上的考量,因此也發展出其他物種的Lentivirus,例如FIV (Feline immunodeficiency virus)。

重組的Lentivirus 由兩個部份所構成,Lentiviral packaging mixture 及Lentiviral expression vector (簡稱 Lentivector)。為了抑制病毒體外重組,通常把這些病毒的結構蛋白分散到不同的載體上,因此packaging mixture 含有不同比例的表現載體,僅表現包裹病毒時所需的結構蛋白,而RNA genome 則由Lentivector 提供,有興趣的基因也是藉由Lentivector 表現。

本期精彩內容包括

Lenti-X HT packaging System不只效率高,安全性更高

全新lentivector,表現量更高

Lenti-X可調控系列,Tet on/off system, RNAi, ProteoTurner~直接調控蛋白

Lenti-X最佳配件包.快速定titer、快速濃縮


2008 第三季

BD Biosciences CBA 體驗微球以一檔十的魅力 請按連結

BD CBA系統為包括一系列同樣大小不同瑩光強度的微球,微球上包覆抗體(Capture antibody),搭配PE標記的檢測抗體(Detection antibody)可以在單一樣本(如血清、血漿、組織培養上清液或細胞溶解物)同時偵測多種分析物。利用微球免疫分析方法( Particle-basedimmunoassay),結合流式細胞儀寬廣的螢光檢測範圍以及高效捕捉分析物的能力,使得BD CBA可以在極少的時間內用極少量的樣本就可以得到多個細胞檢測物的資訊,
相較於傳統的ELISA方法,CBA可以大大減少實驗時間以及所需檢體量。快來體驗看看吧。

BD CBA Flex Set最簡易的多參數檢設系統

微球載體免疫分析法的特色之ㄧ,是針對單一樣本進行多因子平行分析,可避免傳
統”單孔單項”生化方法,因不同的處理步驟,不同的作用環境或不同的作用時間
引起的誤差。CBA”單管多向”的實驗設計,保證所有生物反應作用條件相同,同
時開始、也必定同時終止反應。BD CBA Flex Set是個開放式、可以選配的微球免疫
分析為基礎的系統。結合專利螢光接合法,最優的配對原則和直接標定PE螢光試
劑,保證客戶對複雜的生物樣本進行一致且可靠的分析。

 


 

  2008 第二季

BD Biosciences Apopotosis 詳細內容請按連結 BD Apoptosis Note

源起

凋亡一詞是1972年由澳大利亞病理學家John Kerr首先提出來,本意是花瓣或是樹葉從花或樹上掉落或凋落。而Kerr借用他來描述一種特殊類型的死亡。1965年Kerr及其同事結紮大鼠門脈左支,數小時內大鼠肝左葉開始出現片狀壞死,但周邊部分仍然由肝動脈供血而存活。數週後存活細胞開始變小、變圓、皺縮,細胞膜將包槳及斷裂的染色質分割包圍成緻密的顆粒,以後被周圍的細胞吞噬分解,在細胞死亡的過程中始終保持細胞膜的完整性直到被吞噬消化為止,而且並未在局部發現發炎細胞浸潤。隨後進行了深入研究,終於在1972年將這種細胞死亡現象歸為一種新式的死亡細胞類型-凋亡。

型態學特徵

凋亡細胞最特別的型態特徵是胞核染色質的降解,染色質會聚集於核膜下,成緻密的團塊狀,在一般或電子顯微鏡下觀察可見。染色質的濃極可能是細胞核內DNA裂解的結果,DNA雙鏈發生裂解,先形成約300bp大小的片段,爾後再進一步裂解成180-200bp的核小體,此小体是細胞凋亡的特異性標誌。在尚未形成核小體之前,凋亡細胞會有喪失微絨毛、偽足等胞膜結構,細胞變圓等外觀上的變化; 隨後,細胞會皺縮,胞質濃縮,最後細胞會裂解形成凋亡小體,被巨噬細胞識別並清除之。這種死亡的過程中,不發生胞器及胞膜的破裂,沒有內含物的外泄,故不引起癌症反應及周圍組織的次級損害。

本期詳細介紹細胞凋亡過程Plasma Membrance Alteration、Mitochondrial Changes、Caspase Activation、DNAFragmentation及其偵測方法。

 

 

 


 

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