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TCR, BCR Profiling & Single-Cell Analysis System 介紹

 

# TCR, BCR Profiling 免疫細胞基因庫建構

Takara Bio 獨家 SMART、RACE 技術合體,製備最完整的免疫細胞基因庫

免疫細胞 (T & B 細胞) 上的 T-Cell Receptor 及 B-Cell Receptor 為免疫系統用來辨識外來病原體的工具。透過研究 T-Cell Receptor 及 B-Cell Receptor 其 clonotypes 的多樣性,不僅可以了解健康個體的適應性免疫 (adaptive immune) 反應,還可更明白免疫系統與多種疾病的關係,提供人類開發針對特定疾病的免疫療法模型。

 

Takara Bio 的產品從 RNA 或細胞開始,利用 SMART (Switching Mechanism at 5' End of RNA Template) 與 5' RACE 技術結合來捕獲 V(D)J 序列,從而簡化了整個製備基因庫的過程。

 

Human Repertoire 人類免疫細胞基因庫

產品

SMARTer Human scTCR a/b Profiling Kit

SMARTer® Human TCR a/b Profiling Kit v2

SMARTer® Human BCR IgG IgM H/K/L Profiling Kit

樣本來源

單細胞 (1- 96 cells)

1. 10  ng-1  µg Total RNA (周邊血白血球)
2. 1 -100  ng  Total RNA (T cells)
3. Purified T cells (1,000-10,000 cells) 

1. 10  ng-1  µg Total RNA (周邊血白血球)
2. 1 -100  ng  Total RNA (B cells)

原理

利用 SMART cDNA Synthesis 技術進行全長基因反轉錄,再搭配 RACE-based PCR 針對 TCR 或是 BCR 轉錄體的 V(D)J variable regions 進行特定基因擴增

後續適用定序平台

Illumina

應用

 

・了解單細胞中 TCRα 與 TCRβ chains 配對的狀況

・人類 TCR 基因組庫分析 (TCRα 和 TCRβ subunits)

 

人類 TCR 基因組庫分析 (TCRα 和 TCRβ subunits)

人類 BCR 基因組庫分析 (heavy 和 light [kappa & lambda] chains )

特色

1. 優化的 index 可將 96 個細胞混合製備成 12 個基因庫,並可進一步混合於同一條 flow cell lane中定序


2. 基於 RACE 原理可以檢測低豐度 TCR 變異體


3. SMART 技術能得到完整 reads,大部分 reads 可以比對到目標區域,提供準確鏈配對訊息

1. 以 UMI 訊息進行校正,移除 PCR duplicates 定序錯誤產生的 reads


2. 搭配 UDI index,可以進行樣本混合定序,最多一次定序 192 基因庫 (透過額外購買 UDI)


3. 免費分析軟體 Cogent NGS Immune Profiler Software 進行數據分析

1. 以 UMI 訊息進行校正,移除 PCR duplicates 定序錯誤產生的 reads


2. 精準擴增和偵測 human IgG subclasses

3. 優化的 PCR pooling 策略,
可以高靈敏度地從同一樣本中檢測不同 heavy/ light chains


4. 免費分析軟體 Cogent NGS Immune Profiler Software 進行數據分析

貨號/包裝

634431 (96 Rxns, 12 pooled rxns from 96 cells)

634432 (480 Rxns, 60 pooled rxns from 480 cells)

634478 (12 Rxns, 24U UDI)
634479 (48 Rxns, 24U UDI)

634466 (12 Rxns)
634467 (48 Rxns)

操作手冊

https://pse.is/4ep56s

https://pse.is/4fszrq

https://pse.is/4ffe3l

分析軟體

SMARTer Human scTCR Demultiplexer

Cogent NGS Immune Profiler Software 

Cogent NGS Immune Profiler Software 

 

Mouse Repertoire 小鼠免疫細胞基因庫

產品

SMARTer® Mouse TCR a/b Profiling Kit

SMARTer® Mouse BCR IgG H/K/L Profiling Kit

樣本來源

1. 10  -500 ng Total RNA (小鼠脾臟、胸腺、周邊血白血球)
2. Purified T cells (1,000-10,000 cells) 

10 -3000 ng Total RNA (小鼠脾臟、胸腺、周邊血白血球)

原理

利用 SMART cDNA Synthesis 技術進行全長基因反轉錄,再搭配 RACE-based PCR 針對 TCR 或是 BCR 轉錄體的 V(D)J variable regions 進行特定基因擴增

後續適用定序平台

Illumina

應用

小鼠 TCR 基因組庫分析 (TCRα 和 TCRβ subunits)

小鼠 BCR 基因組庫分析 (heavy 和 light [kappa & lambda] chains )

特色

1. 獲得完整的 V(D)J 序列訊
2. 可同時或單獨分析 TCR-α 和 
β chain
3. 無需 multiplex PCR,每次反應僅利用一對引子擴增相應的 TCR subunit

1. 精準擴增和偵測 mouse IgG subclasses
2. 優化的 PCR pooling 策略,可以高靈敏度地從同一樣本中檢測不同 heavy/ light chains

貨號/包裝

634402 (12 Rxns)
634403 (48 Rxns)
634404 (96 Rxns)

634422 (12 Rxns)
634423 (48 Rxns)
634424 (96 Rxns)

操作手冊

https://pse.is/Q7QGE

https://pse.is/SS7RG

 


# BD Rhapsody™ Single-Cell Analysis System 單細胞基因表現分析系統 

 全新單細胞捕獲系統,實現單細胞多體學研究的最佳工具

單細胞的實驗除了使用 FACS 進行單顆細胞的分離,市面上多款的單細胞分選及建庫系統當中,以熱門新星 BD Rhapsody™ Single-Cell Analysis System 最為吸引目光!其最大的特點在於能夠同時探討單細胞基因體與蛋白體學 (Ab-Seq) 層面,以高通量多體學的角度了解細胞之間的異質性對於組織或疾病的影響,甚至病原與宿主之間複雜的交互作用。近期新推出的 TCR/BCR 分析搭配新一代磁珠,可完美結合原先 WTA/Targeted-RNA 與 AbSeq 應用,為研究提供更多維度的解析。

 

A brief workflow of BD Rhapsody TCR analysis

 

Microwells 高效率補獲細胞, 不因管道堵塞丟失樣本

可執行 100-40,000 大範圍單細胞實驗

提供 scRNA-Seq, Targeted-RNA seq 與 VDJ 等應用

多體學研究:AbSeq 實現單細胞基因與蛋白同時分析

Sample Multiplexing kit 提供混樣上機

88 萬組獨特 CL 序列標記單細胞、專利 UMI 計算真實基因表現

Seven Bridges Genomics 雲端平台,SeqGeq 視覺化分析軟體支援

 
 

  唯一即時提供QC的單細胞平台,為每個上機流程把關  

・Sample QC: 上機前細胞濃度與存活率

・Cartridge QC: 細胞與磁珠沉降效率、複數細胞及回收效率等

  

 
 

 

應用 品名 貨號 包裝
單細胞分離及基因庫建構 儀器- BD Rhapsody Express Package  633707 Each
儀器- BD Rhapsody Scanner 633701 Each
BD Rhapsody cDNA Kit 633773 Each
BD Rhapsody WTA Amplication Kit 633801 Each
BD Rhapsody Enhanced Cartridge Reagent Kit 664887 Each
BD Rhapsody TCR/BCR Amplification Kit 665345 Each
BD Rhapsody Cartridge Kit 633733 Each
Human Single Cell Sample Multiplexing Kit 633781 12 samples
Mouse Immune Single-Cell Multiplexing 633793 12 samples